一、細(xì)胞大小測定也稱顯微測微實(shí)驗(yàn)， 主要是利用目鏡測微尺和鏡臺(tái)測微尺配合使用對細(xì)胞大小進(jìn)行測定。
A:鏡臺(tái)測微尺:是一種特制的載玻片，中央有一個(gè)全長1 mm 的刻度標(biāo)尺，將1 mm 等分成100 個(gè)小格，每格長度為10 μm，用它來校正標(biāo)定目鏡測微尺每小格的長度。
B:目鏡測微尺:是一塊可放在目鏡內(nèi)的圓形薄片，中央有刻度，并被分為50 小格，每小格的長度隨物鏡放大倍數(shù)的大小而變動(dòng)。測量細(xì)胞大小之前，預(yù)先用鏡臺(tái)測微尺來標(biāo)定某一物鏡放大倍數(shù)下目鏡測微尺每小格所代表的實(shí)際長度，再以它作為測量細(xì)胞的尺度。
二、細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)利用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行操作，其構(gòu)造和計(jì)數(shù)原理是整個(gè)實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。
血球計(jì)數(shù)板:
由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成，玻片中有4 條下凹的槽，構(gòu)成3 個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面刻有一個(gè)方格網(wǎng)。方格網(wǎng)上刻有9 個(gè)大方格，其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室，供計(jì)數(shù)用。這一大方格的長和寬各為1 mm，深度為0.1 mm，其體積為0.1 mm3。經(jīng)過恰當(dāng)稀釋的細(xì)胞懸液，加到血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室中，在顯微鏡下逐格計(jì)數(shù)，由于計(jì)數(shù)室的容積是固定的，故可將在顯微鏡下計(jì)得的菌體細(xì)胞數(shù)換算成單位體積的細(xì)胞數(shù)量， 經(jīng)過此方法可測得樣品中細(xì)胞總和。
三、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）利用小方格邊長50 μm 進(jìn)行標(biāo)定目鏡測微尺時(shí)，易產(chǎn)生2 種不同的結(jié)果。有些人目鏡測微尺兩端重疊時(shí)用的是靠近中方格的小方格，而計(jì)數(shù)室的特點(diǎn)就是中方格的邊緣線都為雙線， 靠近中方格的小方格的一邊也為雙線，導(dǎo)致結(jié)果不一致。所以要正確的利用單線小方格的邊長進(jìn)行標(biāo)定目鏡測微尺。
2）充分利用血球計(jì)數(shù)板， 不僅利用其小方格邊長的固定值，同時(shí)也利用其充當(dāng)載玻片，在計(jì)數(shù)室內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，在計(jì)數(shù)室內(nèi)外都可以進(jìn)行細(xì)胞大小的測定。
3）細(xì)胞大小測定時(shí)，觀察酵母細(xì)胞應(yīng)選擇代表性的細(xì)胞， 不要選擇剛剛出芽脫落下來的幼齡酵母，也不要選擇有明顯吸水膨脹的老齡酵母，觀察時(shí)一般選擇5~10 個(gè)典型酵母細(xì)胞求平均值。
4）細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)避免重復(fù)計(jì)數(shù)， 減少誤差， 嚴(yán)格按照“ 計(jì)左不計(jì)右，計(jì)上不計(jì)下” 的原則， 遇到有出芽的酵母， 只有當(dāng)芽體與母細(xì)胞一樣大時(shí)計(jì)為2 個(gè)。
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